骨成型蛋白(BMP)是一類由骨髓和多種其他組織分泌的細胞因子,能夠在體內調節骨骼的生長、修復和再生。骨成型蛋白3(BMP-3)作為BMP家族的一員,尤其在骨骼的發育和礦化過程中發揮重要作用。
ELISA(酶聯免疫吸附試驗)試劑盒是檢測BMP-3等生物標志物的常用工具,通過高特異性和高靈敏度的檢測,可以定量地分析樣本中的BMP-3水平。

人骨成型蛋白3(BMP-3) elisa試劑盒的基本原理:
1.捕獲抗體:ELISA板上預先涂布有抗BMP-3的捕獲抗體,這些抗體能夠與樣本中的BMP-3分子特異性結合。
2.樣本加入:將待測樣本(如血清、血漿或細胞培養上清液等)加入ELISA板孔中,BMP-3與捕獲抗體結合形成復合物。
3.檢測抗體:加入二次抗體,該抗體也能夠與BMP-3分子結合,并且連接有酶(通常為辣根過氧化物酶)。
4.底物反應:添加底物溶液后,酶催化底物反應,產生顏色變化。
5.測定吸光度:通過酶反應產生的顏色變化,可以通過酶標儀測定吸光度值,進而計算出樣本中BMP-3的濃度。
操作流程:
1.樣品稀釋:根據試劑盒說明書,稀釋樣本至合適濃度。
2.加樣:將樣本加到預先涂布有抗BMP-3捕獲抗體的微孔板上,孵育一定時間。
3.洗滌:用洗滌液清洗板孔,去除未結合的成分。
4.添加檢測抗體:加入含有酶標記的二級抗體,繼續孵育。
5.洗滌:再次洗滌,去除多余的二級抗體。
6.底物反應:加入底物液,觀察顏色變化。
7.測量吸光度:用酶標儀測量各孔的吸光度值,計算BMP-3的濃度。
人骨成型蛋白3(BMP-3) elisa試劑盒的注意事項:
1.實驗過程中需要嚴格按照試劑盒說明書進行操作,以保證結果的準確性。
2.樣品的質量和處理方法直接影響檢測結果,應保證樣品的新鮮度和無污染。
3.避免試劑和樣品的交叉污染,確保每步操作的清潔和準確。